Elaboración de un catálogo de bacterias cultivables como línea base de aislamientos con potencial hidrocarbonoclasta, de dos zonas con alta influencia petrolífera en Colombia
Fecha
2022
Autores
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Editor
Universidad EAFIT
Resumen
From suspensions of environmental substrates (water, soil and sediment) from two zones with
high oil influence in the country (Magdalena and Casanare) were isolated through
conventional cultivation, 200 strains that formed the baseline of a catalog of
bacterial biological interpretation. In this study, emphasis was placed on the cultivation process,
isolation and integral identification (morphological, biochemical and genetic) of the isolates,
with a view to understanding the repertoire and its functional dynamics. Molecular identification is
based on genomic analysis from DNA sequencing and direct amplification of the 16s gene
rRNA from bacterial biomass. Additionally, through the use of a minimal medium of salts
supplemented with hydrocarbons at 1% v/v as the only carbon source, 27 were identified
strains with hydrocarbonoclastic potential. The strains identified as tolerant to crude and
bacterial consortia inoculated from soil samples directly, were tested
of biodegradation, evaluating the percentage transformation of total hydrocarbons of
oil (HTP) in 30 days of incubation. The biodegradation rates of HTP were determined
under gas chromatography analysis coupled to a flame ionization detector (GCFID)
and were related to the growth kinetics (CFU/mL) of the isolates through
of the incubation time (30 days). Under observation time and post-identification
molecular biodegradation of the isolates members of genera such as:
Bacillus, Pseudomonas, Enterobacter and Burkholderia-Caballeronia-Paraburkholderia, in a
range between 53.66 and 82% and in one of the consortiums 91.28%. The strains evaluated
demonstrated an important enzymatic potential to degrade hydrocarbons and provide the
opportunity to continue with the study of the bioremediation potential in areas affected by
hydrocarbon contamination.
Descripción
Desde suspensiones de sustratos ambientales (agua, suelo y sedimento) de dos zonas con
alta influencia petrolífera del país ( Magdalena y Casanare) se aislaron a través de medios
convencionales de cultivo, 200 cepas que conformaron la línea base de un catalogo de
interpretación biológica bacteriana. En este estudio se hizo énfasis en el proceso de cultivo,
aislamiento e identificación integral ( morfológica, bioquímica y genética) de los aislamientos,
con miras a la comprensión del repertorio y su dinámica funcional. La identificación molecular se
basó en análisis genómicos a partir de la secuenciación de ADN y amplificación directa del gen 16s
rARN desde biomasa bacteriana. Adicionalmente, a través del uso de un medio mínimo de sales
suplementado con hidrocarburos al 1% v/v como única fuente de carbono, se identificaron 27
cepas con potencial hidrocarbonoclasta. Las cepas identificadas como tolerantes al crudo y
consorcios bacterianos inoculados de muestras de suelo directamente, se sometieron a pruebas
de biodegradación, evaluando la transformación porcentual de hidrocarburos totales de
petróleo (HTP) en 30 d as de i incubación. Las tasas de biodegradación de HTP, se determinaron
bajo un análisis de cromatografía de gases acoplado a un detector de ionización de llama (GCFID)
y se relacionaron con la cinética de crecimiento (UFC/mL) de los aislamientos a través
del tiempo de incubación(30 días). Bajo el tiempo de observación y posterior a la identificación
molecular se evidenció l a biodegradación de l os aislamientos miembros de géneros como:
Bacillus, Pseudomona, Enterobacter y Burkholderia-Caballeronia-Paraburkholderia, en un
rango entre el 53.66 y 82 % y en uno de l os consorcios del 91.28 %. Las cepas evaluadas
demostraron un importante potencial enzimático para degradar hidrocarburos y brindan l a
oportunidad de continuar con el estudio del potencial de biorremediación en áreas afectadas por
contaminación de hidrocarburos.
Palabras clave
Hidrocarbonoclastas, Biodegradación crudo, Catálogo bacteriano